本产品是一款以磁珠为纯化介质的外泌体microRNA提取试剂盒，专门用于提取外泌体中的microRNA，用于反转录、Northern Blot或测序等生物学实验。
组分信息
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使用说明
- 自备耗材
异丙醇，无水乙醇，15 mL 离心管，RNase - free EP管和枪尖。
2. 使用说明
1）在Wash Buffer D（漂洗液）中加入21 mL无水乙醇，混匀，制备漂洗液。
2）按照外泌体溶液：microRNA裂解液（Lysis Buffer for microRNA）=1 : 3 的比例，在 1 mL外泌体溶液中加入 3 mL microRNA提取裂解液，混匀，室温静置 3 - 5 min。
3）将混合液体转移至DNA去除柱内，12, 000 g，4℃离心2 min，保留滤液，弃DNA去除柱。
4）向滤液中加入等体积的异丙醇（4 mL，使异丙醇的终浓度达到50%以上），颠倒混匀。
5）加入50 μL磁珠（吸取磁珠前先震荡混匀），置于静音混合器中4℃旋转孵育30 min。
6）取出离心管，置于磁力架上，使磁珠聚集；或置于离心机中，3, 000 g，4℃离心2 min，沉淀磁珠。弃上清。
7）加入 0.5 - 1 mL Wash Buffer C（去蛋白液），轻微震荡（Vortex，1,000 rpm）30 sec，洗涤磁珠，离心法或磁力法沉淀磁珠，弃上清。
8）加入 0.5 - 1 mL Wash Buffer D（漂洗液，注意是否加入乙醇）, 轻微震荡（Vortex，1,000 rpm）30 sec，洗涤磁珠，离心法或磁力法沉淀磁珠，弃上清。
9）3, 000 g，4℃离心 2 min，沉淀磁珠，用移液枪移除残液。
10）加入100 μL Elution Buffer R 或 RNase-free ddH2O，震荡（Vortex，2,000 rpm），30 sec，洗脱RNA。
11）置于磁力架上使磁珠聚集，或 7, 000 g，4℃离心 2 min，沉淀磁珠。转移上清液至新的EP管中，即为microRNA溶液。
12）测定microRNA 浓度与纯度，用于反转录或其它实验，或保存于-80℃冰箱。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 请使用RNase - free的器具与耗材，如EP管，枪尖等。
4. 整个实验过程需要低温操作。
5. 请使用新鲜的外泌体样品或-80℃保存的外泌体样品，避免microRNA降解。
常温运输，Magnetic Bead 4℃保存，其他试剂常温保存，有限期2年。
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