天然蛋白A(Protein A)是一种发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面蛋白,与分离自G型或C型链球菌属的蛋白G类似,主要通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc区相互作用,结合大多数哺乳动物的IgG,可用于多种抗体(单抗和多抗)的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上,ProteinA 和Protein G结合性能不太一样(详见附录1)。
本品使用的是基因改造后的蛋白A,不仅维持其本身的Ig亲和特性,同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合,rProtein A Agarose Resin 4FF以高度交联的琼脂糖凝胶为基质,重组Protein A为配基,具有很高的物理化学稳定性,可以在相对较高的流速下进行抗体的纯化,适用于工业客户。利用本品经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
本品rProtein A 4FF Chromatography Column,1 mL是一种装填了rProtein A Agarose Resin 4FF的中压预装柱,规格1 mL,预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA 等,方便客户操作。
基质(Matrix) |
高度交联的4%琼脂糖微球 |
配体(Ligand) |
重组蛋白A |
孔径(Bead size) |
45-165 µm |
最大流速(Flowmax) |
0.3MPa,3bar |
储存缓冲液(Buffer) |
含20%乙醇的1×PBS |
载量(Capacity) |
>40 mg Rabbit IgG/ mL 基质 |
pH范围(pH range) |
3-12 |
冰袋运输。2~8℃保存,有效期2年。
Q:购买了该产品,还需要额外再购买相应填料吗?
A:不需要了,本品含有填料。
Q:为什么柱子反压过高?
A:可能是填料被堵塞;裂解液中含有微笑的固体颗粒,建议上柱前使用 0.22 µm/0.45µm 滤膜过滤。
Q:为什么洗脱组分中没有目的蛋白?
A:可能是抗体被降解;建议适当的提高洗脱pH。
Q:为什么样品纯化过程中曲线不稳?
A:可能是样品或 buffer 中有气泡;建议样品和buffer 进行脱气。