MBPSep Dextrin Agarose Resin 是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白(MBP)标签蛋白的亲和层析介质,MBP可促进连接蛋白的正确折叠,增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF可以一步纯化MBP融合蛋白,结合的融合蛋白可以用10 mM麦芽糖进行温和洗脱,保护了目的蛋白的活性,MBP融合部分后续可用位点特异性蛋白酶切除。此外,MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。
MBPSep Dextrin 6FF Chromatography Column, 5 mL是装填了MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF的一种中压预装柱,规格5 mL,预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。
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基质(Matrix) |
高度交联的6%琼脂糖微球 |
配体(Ligand) |
糊精 |
粒径(Bead size) |
45-165 µm |
载量(Capacity) |
>10 mg MBP蛋白(80 kDa)/mL基质 |
最大压力(PressureMax) |
0.3 MPa,3 bar |
pH稳定范围(pH range) |
3-12 |
储存缓冲液(Buffer) |
含20%乙醇的1×PBS |
2~8℃保存,有效期2年。
Q:为什么柱子反压过高?
A:可能是填料被堵塞;裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上样前最好用 0.22µm 或0.45µm 滤膜过滤,或离心去除。
Q:填料可以使用多少次?
A:由于非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集,会造成流速和结合载量性能下降。具体实验次数需要根据柱效和实验结果。
Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?
A:可能是融合蛋白使麦芽糖结合位点阻塞或扭曲影响了目的蛋白的结合力;建议更换载体。
Q:为什么洗脱样品较杂?
A:可能是平衡/洗杂不充分;建议加一些蛋白酶抑制剂,如PMSF、EDTA 等。
[1] Xu C, Ye P, Wu Q, et al. Identification and functional characterization of three iridoid synthases in Gardenia jasminoides. Planta. 2022;255(3):58. Published 2022 Feb 3. doi:10.1007/s00425-022-03824-3(IF:4.116)