天然蛋白A(Protein A)是一种发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面蛋白,与分离自G型或C型链球菌属的蛋白G类似,主要通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc区相互作用,结合大多数哺乳动物的IgG,可用于多种抗体(单抗和多抗)的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上,ProteinA 和Protein G结合性能不太一样(详见附录1)。
本品使用的是基因改造后的蛋白A,不仅维持其本身的Ig亲和特性,同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合,耐碱rProtein A Agarose Resin 以琼脂糖凝胶为基质,修饰的耐碱重组Protein A为配基,具有很高的物理化学稳定性。利用本品经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
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基质(Matrix) | 4%高度交联的琼脂糖微球 |
配体(Ligand) | 耐碱重组 Protein A |
孔径(Bead size) | 90 µm |
耐压(MPa) | 0.3 MPa |
储存缓冲液(Buffer) | 含20%乙醇的1×PBS |
载量(Capacity) | 50 mg/mL |
耐碱性(alkali resistance) | 0.1-0.5M NaOH |
2~8℃保存,有效期5年。
Q:该产品可以直接使用吗?
A:Protein A 琼脂糖珠最好在使用前充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。
Q:该产品可以贮存在-20℃吗?
A:不可以,不可冷冻该产品。应置于 4°贮存。
Q:为什么样品纯化过程中曲线不稳?
A:可能是样品或buffer 中有气泡;建议样品和 buffer 进行脱气。
Q:为什么回收率逐渐减低?
A:可能是柱子太脏,载量降低;建议清洗树脂。
[1] Shi W, Li W, Zhang J, et al. One-step synthesis of site-specific antibody-drug conjugates by reprograming IgG glycoengineering with LacNAc-based substrates. Acta Pharm Sin B. 2022;12(5):2417-2428. doi:10.1016/j.apsb.2021.12.013(IF:11.614)
[2] Wang Y, Ding Y, Li C, Gao J, Wang X, An H. Alpha-linolenic acid inhibits IgE-mediated anaphylaxis by inhibiting Lyn kinase and suppressing mast cell activation. Int Immunopharmacol. 2022;103:108449. doi:10.1016/j.intimp.2021.108449(IF:4.932)