2×Hieff® PCR Master Mix是即用型的常规PCR预混合溶液,含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及优化的缓冲体系。反应时只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤。本产品中含有优良的稳定剂,在4℃条件下以放置3个月。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。
- 快速:延伸速度达到30-60sec/kb
- 片段扩增:4 kb
- 稳定性强:4℃放置3个月,性能有保证
- T载体克隆:PCR产物具有3’-dA突出端
- 高GC含量扩增:已验证70% GC含量的DNA片段
- 模板结构易被打开,适合高GC模板的扩增
高GC含量基因可轻松扩增。基因GC含量:泳道1-4分别为40%、50%、60%和70%。泳道5-8为泳道1-4的模板阴性对照。模板:人293T细胞基因组。退火温度:60℃。延伸速度:30 s/kb。M:1 kb ladder。
- 4℃ 3个月,扩增性能稳定
极强的稳定性。产品分别在-20℃放置1年,4℃放置3个月,25℃放置1个月,均可有效扩增目的片段。模板:拟南芥基因组。退火温度:60℃;延伸时间:30 s。M:1 kb ladder。
-25~-15℃保存,有效期2年。
Q:PCR Mix 可以用于 PAGE 电泳吗?
A:不建议,PCR Mx 中含有影响 PAGE 胶电泳的组分。推荐客户使用 10101 。
Q:PCR Mix 可以减少体系么?
A:可以,使用的引物、模板等比减少使用。
Q:10102 和 10103 有什么区别?
A:区别在于 10102 预混有溴酚蓝指示剂。后续可直接进行凝胶电泳。而 10103 中无溴酚蓝指示剂,电泳时需要添加DNA loading buffer。
Q: 扩增完送测序。应选有染料的还是无染料?
A: 都可以。PCR 产物测序,测序公司会先进行纯化。
Q:PCR Mix 扩增完成后,可以直接做酶切吗?
A:不建议,某些组分可能会影响酶切效果。
Q:PCR Mix 有没有 3’-5’的外切酶活性?PCR Mix 扩增产物类型?
A:没有 3’-5’的外切酶活性,产物带有 3’-A。可用于TA 克隆。
[1] Liu Y, Lai M, Li S, et al. LS-106, a novel EGFR inhibitor targeting C797S, exhibits antitumor activities both in vitro and in vivo. Cancer Sci. 2022;113(2):709-720. doi:10.1111/cas.15229(IF:6.716)