本试剂盒是利用拓扑异构酶(Topoisomerase)高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成,与传统的T4连接酶相比,具有以下优势:
1)快速,仅需1-5分钟即可完成连接反应;
2)高效,无自连现象,阳性克隆率接近100%,无需设置蓝白斑筛选;
3)操作简单,从连接到涂板仅需15-20 min。操作过程省去冰浴、热激和1 h复苏;
4)可连接长达5 kb目的产物;
5)Hieff Clone® Topo-blunt simple vector不含多克隆酶切位点(MCS),使用者在引入后续酶切位点进行酶切操作时,不会受到MCS位点的影响,从而增加酶切效率以及克隆成功率。
- 快速、高效、操作简单、后续不受MCS位点影响
冰袋运输。-20℃保存,避免反复冻融。有效期一年。
Q:客户可以连接自己的载体吗?
A:不可以。
Q:多克隆酶切位点和没有多克隆酶切位点用途上有什么区别?
A:克隆酶切就用 10910,没有酶切位点的,方便后续连接。
Q:10910 用什么酶切
A:不用酶切,直接连接就可以。
Q:TOPO 试剂盒载体多大?
A:TOPO 克隆试剂盒都是 1.8kb,这个载体已经被修饰了,电泳跑出来会大于 2kb。
Q:含氨苄抗性的LB或SOC固体培养基的抗性浓度是多少?
A:一般100ug/ml。
[1] Xie C, Xiong L, Ye M, et al. Genome-wide analysis of V-ATPase genes in Plutella xylostella (L.) and the potential role of PxVHA-G1 in resistance to Bacillus thuringiensis Cry1Ac toxin. Int J Biol Macromol. 2022;194:74-83. doi:10.1016/j.ijbiomac.2021.11.169(IF:6.953)
[2] Wang C, Xu L, Liang X, et al. Molecular characterization and overexpression of the difenoconazole resistance gene CYP51 in Lasiodiplodia theobromae field isolates. Sci Rep. 2021;11(1):24299. Published 2021 Dec 21. doi:10.1038/s41598-021-03601-4(IF:4.380)
[3] Li X, Guo G, Lu M, et al. Long Noncoding RNA Lnc-MxA Inhibits Beta Interferon Transcription by Forming RNA-DNA Triplexes at Its Promoter. J Virol. 2019;93(21):e00786-19. Published 2019 Oct 15. doi:10.1128/JVI.00786-19(IF:4.324)
[4] Yu B, Yang Q, Wei J, Pan G, Li C, Zhou Z. UDP-Glucosyltransferases Induced by Nosema bombycis Provide Resistance to Microsporidia in Silkworm (Bombyx mori). Insects. 2021;12(9):799. Published 2021 Sep 7. doi:10.3390/insects12090799(IF:2.769)