目前常用的细胞增殖标记物有4种,DNA聚合酶α(DNA polymerase α),增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA),Ki-67和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)。其中Brdu为组织细胞非内源性表达存在,应用相对较广。Brdu,也称为溴化去氧尿苷,一种合成的胸苷类似物,在S期可替代胸腺嘧啶核苷选择性结合到细胞DNA中。从而检测细胞DNA合成和标记细胞分裂,凋亡等行为。在遗传研究中Brdu可通过活体注射或细胞培养加载,然后使用抗Brdu的单克隆抗体进行特异性标记,ICC或IHC法染色法显示增殖细胞。另外,还能同时结合其它细胞标记物,双重染色,来判断增殖细胞的种类,增殖速度等,对研究细胞动力学有着重要意义。
中文别名(Chinese Synonym) | 5-溴-1-(2-脱氧-β-D-呋喃核糖)尿嘧啶;5-溴脱氧尿苷;溴化去氧尿苷; |
英文别名(English Synonym) | Br-dU; BUdR; 5-BrdU; 5-Bromodeoxyuridine; |
CAS号(CAS NO.) | 59-14-3 |
分子式(Formula) | C9H11BrN2O5 |
分子量(Molecular Weight) | 307.10 |
外观(Appearance) | 白色或类白色粉末 |
熔点(Melting Point) | 187-189℃ |
纯度(Purity, HPLC) | ≥99% |
溶解性(Solubility) | 溶于1M 氢氧化铵(50 mg/mL),水(高达10 mg/mL);溶于DMF,DMSO,水(加热)(50-100 mg/mL) |
结构式(Structure) | ![]() |
冰袋运输。-25~-15℃干燥保存,有效期2年。
Q:这个 BrdU 怎么用,需要 37℃加热吗?
A:需要 37℃加热
Q:冰冻切片的 BrdU 染色,不出结果,满片子都是非特异染色,胞浆着色?
A:可能是灌注时没有灌干净,红细胞留在组织里,最后就是掌握显色时间。
Q:用于动物和细胞上,然后一抗二抗染色无荧光信号?
A:封闭前需要使用2N盐酸处理1h,然后洗去盐酸,再加入等量的0.1M Na2B4O7 室温浸泡15min,洗去四硼酸钠。目的是:2N盐酸可以使DNA双链变性解开,暴露存在DNA双链中的抗原,即充分暴露BRDU; Na2B4O7 中和盐酸的酸化,若不进行中和会引起后期抗体效价下降,从而导致染色结果不好或者染不出来。
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