Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。可用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可用于活细胞或组织的细胞核染色。
本系列产品均以溶液形式提供，其中Hoechst 33258 染液 (1 mg/mL)（Cat No.40730ES03）为特定浓度的产品，其浓度为1 mg/mL。用于细胞核染色时，推荐工作浓度为0.5-10 μg/mL。如需使用粉末状该产品，可选购Hoechst 33258（Cat No. 40729ES25）。
| 中文名称（Chinese Synonym） | 二苯甲亚胺, 三氯化氢 2'-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑 |
| 英文名称（English Synonym） | 2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride；bisBenzimide H 33258; HOE 33258 |
| 分子式（Molecular Formula） | C25H24N6O·3HCl |
| 分子量（Molecular Weight） | 533.88 |
| CAS号（CAS NO.） | 23491-45-4 |
| 荧光光谱（Fluorescence Spectral） | Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460; 荧光可用氙气灯，泵弧灯或者UV激光激发；可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。 |
| 纯度（Purity） | ≥95%（HPLC） |
| 结构（Structure） |  |
冰袋（wet ice）运输。4℃避光保存。
1 mg/mL 的Hoechst 33258储存液，有效期1年。
Q:染液 33258 和 33342 这两个什么区别？
A: 两者区别不大，但是 Hoechst 33342 对细胞的毒性作用更小一些，因此一般 Hoechsts 33258 用于细胞固定后再染色，而 Hoechst 33342 则可以对活细胞直接进行染色。
Q．DAPI和Hoechst染料相当类似，如何二选一？
A：DAPI是非常通用的蓝色荧光染料，用于细胞核复染。对固定和透化的细胞/组织，具有非常明亮的细胞核标记。然而，此染料被认为是半渗透至不渗透的染料，用于活细胞染色的结合不一致。Hoechst 33342是一种细胞膜渗透性的染料，具有同DAPI的结合机制和荧光特征。非常适合用于活细胞成像，效果就如同DAPI用于固定细胞染色。
[1] He Y, Gallman AE, Xie C, et al. P2RY8 variants in lupus patients uncover a role for the receptor in immunological tolerance. J Exp Med. 2022;219(1):e20211004. doi:10.1084/jem.20211004(IF:14.307)
[2] Shen S, Li B, Dai J, et al. BRD4 Inhibition Protects Against Acute Pancreatitis Through Restoring Impaired Autophagic Flux. Front Pharmacol. 2020;11:618. Published 2020 May 8. doi:10.3389/fphar.2020.00618(IF:4.225)
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