在一些蛋白和质粒DNA生产中使用大肠杆菌进行重组表达是一种相对简单且经济有效的方式。使用了大肠杆菌进行产品生产的工艺过程中，很有可能会污染来自大肠杆菌的宿主细胞蛋白(HCPs)，这种污染可能会降低治疗药物的疗效，并导致不良的毒性或免疫反应，因此在用于人类或动物的治疗类药物的生产纯化过程中，需要将该杂质含量尽可能降到最低。ELISA法是一种使用简单、灵敏度高且客观的HCPs检测方法。本试剂盒应用双抗夹心酶联免疫检测(ELISA)的实验原理进行E.coli HCP残留量检测，将E.coli HCP标准品和待测样本加入预包被抗E.coli HCP抗体的酶标板(36712-A)，然后加入稀释后的生物素标记的E.coli HCP检测抗体(36712-C)，最后加入Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36712-D)，形成抗体+抗原+抗体‐Biotin+SA‐HRP复合物，洗板后加入TMB显色液(36712-G)显色。TMB在HRP酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液(36712-H)的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的E.coli HCP的量呈正相关。本试剂盒可以用于生物制品纯化工艺过程的优化、中间工艺过程的杂质控制以及终产品的放行检测。
- 符合法规：按照Chp、USP、ICHQ2（R2）等要求进行全面验证；
- 保障品质：包被和检测抗体、标准品等原材料全自主研发，可溯源；
- 配合审计：生产工艺稳定，批间差可控，有完善的审计文件；
- 灵敏度高：定量下限(LLOQ)可达3.125 ng/mL，检测下限(LLOD)低至2.22 ng/mL；
- 精密度高：批内重复性高CV＜10%，批间差异小即中间精密度CV＜15%；
- 准确性高：样本加标回收率均在70%~130%范围内；
- 专属性强：向样本中添加不同类型的干扰物，E.coli HCP测试值未见显著性差异；
- 稳定性好：试剂盒在37℃条件下可稳定放置7天，性能不受影响。
1. 检测范围
试剂盒线性范围为3.125～200 ng/mL，R2=0.999，各浓度检测值CV≤5%。标准曲线结果如下：
| 标准品浓度（ng/mL） | 检测平均值（ng/mL） | 回收率（%） | 浓度CV% |
| 200 | 196.600 | 98.3% | 2.1% |
| 100 | 102.782 | 102.8% | 1.8% |
| 50 | 48.470 | 96.9% | 0.9% |
| 25 | 25.160 | 100.6% | 3.6% |
| 12.5 | 13.719 | 109.8% | 1.9% |
| 6.25 | 7.223 | 115.6% | 4.2% |
| 3.125 | 3.711 | 118.8% | 2.4% |
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2~8℃保存，未拆封有效期1年。
*收到货后，请检查各组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存（若近期不使用，请将标准品，检测抗体，酶结合物取出保存于-20℃）。
Q:货号36712ES产品和36721ES产品的区别是什么？
A: 36712ES货号的E.coli HCP试剂盒主要是检测E.coli菌株表达的重组蛋白等样本，针对的是BL21和Rosseta这两个E.coli的菌株。
36721ES货号的E.coli HCP试剂盒主要是检测E.coli 菌株表达的质粒DNA样本，针对的是DH5a和TOP10、Stbl2、Stbl3这些菌株。
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