Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit是基于Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit开发的快速逆转录试剂盒，适用于PCR扩增以及RT-qPCR实验。与Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit相比，具有稳定的检出率、特异性、产量保证，且反转录总时长最快可低于6分钟，大大缩短了实验时间。
该试剂盒包含gDNA Digester Mix，可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染，保证后续结果更加可靠。该试剂盒提供两种cDNA合成引物：Random Primers N6和Oligo (dT)18，用户可根据需要，选择Random Primers N6，Oligo (dT)18或Gene Specific Primers作为逆转录引物，合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR或者qPCR反应。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 11149ES10（10 T） | 11149ES60（100 T） |
|---|---|---|---|
| 11149-A | 4× Hifair®AdvanceFast SuperMix | 50 μL | 500 μL |
| 11149-B | 5×gDNA Digester Mix | 20 μL | 200 μL |
| 11149-C | Random Primers（50μM） | 20 μL | 200 μL |
| 11149-D | Oligo d(T)18 Primers（50μM） | 20 μL | 200 μL |
| 11149-E | RNase-free Water | 200 μL | 2×1 mL |
- 示踪便利：蓝色示踪，提醒客户加样进度
- 下游适用应用：可用于下游PCR或qPCR
- 逆转录时间：反转录时间仅需5分钟
- 检出率：10 pg-1 ug 的RNA检出率
- 逆转录效率：逆转录效率媲美竞品，最长可合成14kb大小的片段
- 试剂盒稳定性：4°C存放14天
- 反转录产物稳定性：37°C保存7天，反复冻融50次
- 快速反转
图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES进行逆转录，得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示，不同反转录时间处理的Ct值差值在0.2之内。说明产品可在5分钟内完成反转录，反转效果和长时间反转效果持平。
- 灵敏度高，最低可至10 pg
图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES进行逆转录，得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示，RNA 投入量为10 pg-1 μg时，11149ES均可反转成功，保证定量结果。
- 扩增性能好，最长扩增14 kb片段
图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES进行反转录，将得到的cDNA进行PCR检测。结果显示，11149ES能够满足合成1 kb-14 kb长度的cDNA, 后续PCR有一定的试用场景。若需要直接反转出10kb以上的片段，建议延长反转录时间至20-30分钟，以保证最终片段的获取。
- 示踪便利
图. 测试显示，加入一定量的示踪剂成分，未影响产品的反转录效率，Ct值、熔解曲线峰值和TM值未受到负面影响。
- 反转录效率比对
图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES、进口A品牌进行逆转录，其中11149ES不进行gDNA去除步骤，将得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示，进口A品牌反转时间为13分钟， 11149ES反转时间为5分钟，不同产物定量显示，11149ES的Ct更小或者接近进口竞品，说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口A品牌的反转录效率。
图. 以293T细胞总RNA为模板，使用11149ES、进口B品牌进行逆转录，其中11149ES不进行gDNA去除步骤，得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示，进口B品牌反转时间为20分钟，11149ES反转时间为5分钟，不同量底物定量显示，11149ES的Ct更小或者接近进口B品牌，说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口B品牌的反转录效率。
冰袋运输。-20℃保存，有效期12个月。逆转录产物可立即用于后续反应，也可-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。
Q：11149ES和11150ES有什么区别？
A：11149ES带有蓝色示踪剂，可提示加样进度。11150ES不带有示踪剂。经测试，添加一定量的示踪剂不影响反转录效率，后续qPCR的Ct值、熔解曲线峰值和TM值未受到负面影响。其它应用场景，如担示踪剂影响，可选11150ES。
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