UltraNuclease(全能核酸酶),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于SerratiaMarcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6MUrea,0.1MGuanidineHCl,0.4%TritonX-100,0.1%SDS,1mMEDTA,1mMPMSF)降解各种形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。本品经基因工程改造在Escherichiacoli(E.coli)中表达纯化并在GMP环境下制备,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20mMTris-HClpH8.0,2mMMgCl2,20mMNaCl,50%甘油)中,无色透明液体。
产品性质
来源 | E. coli |
分子量(Molecular Weight) | 26.5 kDa |
等电点 | 6.85 |
纯度(Purity) | ≥ 99%(SDS-PAGE) |
酶活(Enzyme Activity) | 250-300 U/μL |
比活(Specific Activity) | ≥ 1.5×106 U/mg蛋白 |
最适pH(Optimum pH) | 8.0(工作范围pH 6-10) |
最适温度(Optimum Temperature) | 37℃(工作范围0-42℃) |
辅助因子(Cofactor) | 1-10 mM Mg2+ |
蛋白酶活性(Protease) | 阴性 |
无菌检查(Sterility) | 阴性 |
内毒素(Endotoxin) | < 0.25 EU/1000 U |
宿主蛋白残留(Host protein) | < 10 ppm(μg/mL) |
储存缓冲液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油 |
活性单位定义(Unit Definition) | 在37℃,pH 8.0反应条件下,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。 |
高活性与高效性:具备高比活性(比活>1.50 x 10⁶ U/mg),能够快速、高效地降解核酸。
高安全性:经过严格的无菌、内毒素、支原体、外源病毒等检测,确保产品安全性,尤其适用于对安全性要求极高的临床或上市申报项目。
高稳定性:经受住加速、冻融、实时稳定性等多重验证,保证产品在不同储存和使用条件下的高性能,确保结果的可靠性。
法规支持与保障:完成DMF备案(MF036357),为产品的临床及上市申报提供有力支持,确保产品符合相关法规要求。
单因素对比测试结果显示:与竞品M 公司之间无显著性差异
干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存,有效期2年。若是打开包装后并4℃放置超过一周,建议过滤除菌防止微生物污染。
Q:全能核酸酶储存条件是什么?
A:保存于-20℃。储存 Buffer:20mM Tris-HCl pH8.0,50 mM NaCl,2mM MgCl2, 50% glycerin。
Q:反应pH 应在什么范围?
A:建议反应体系pH 值为 6~8
Q:反应中需不需要加Mg2+?
A:反应中Mg2+的终浓度为 5~10mM。
Q:样本黏度高,不易过柱,怎么办?
A:细胞破碎后由于含有大量 DNA 和 RNA,黏度很高,过柱不容易。解决的方法有两种:(1)用核酸酶。(2)也可以用高压匀浆。都可以达到降低黏度的作用。差别在于:用核酸酶,DNA 和RNA 可以绛解成小片段或单核苷酸;高压匀浆用机械剪切力将 DNA和 RNA 处理成较大的片断。超声波处理在处理小量表达的时候问题不大,但做大量蛋白表达的时候有困难。核酸酶的另外一个重要应用是:若你的目的蛋白是 DNA 结合蛋白,那么纯化的时候最好先用核酸酶处理。
Q:这个对于细胞培养基该怎么使用呢?Ph改变后会影响酶条件反应条件吧?(你们最优的条件是啥?影响因素多吗?)
A:细胞培养使用步骤可以参考说明书,有详细说明,全能核酸酶影响酶效的因素有很多,一下数据可以参考。
Q:为啥你们的酶活是一个区间?默克是一个大于250u/μl?
A:我我们对于酶活进行了区间测定,为了更准确的使客户有精确使用量,默克的是一个大于250u。
Q:你们的纯度确定和默克的区别?HPLC有什么优势吗?
A:我们的纯度测定是采用高相液相的方式(HPLC),默克的采用是SDS测定,纯度都大于99%。行业一般认为HPLC的方式会比SDS的方式更为准确些。