2020年9月29日/医麦客新闻 eMedClub News/--随着生物科技的发展，细胞治疗和基因治疗业已成为重要的前沿疾病治疗技术，利用RNA体外合成技术制备的mRNA疫苗在2020年突发的COVID-19传染病上产生了巨大的影响。很多公司如美国Moderna、德国CureVac、BioNTech等均已经开展了其他疾病如肿瘤、传染病、慢性病等治疗性mRNA疫苗和药物开发。

 

▲ 图：基于mRNA（癌症）疫苗开发中的开创性阶段和里程碑^[1]

 

表1：国内外主要的mRNA疫苗公司概况

 

公司名称	成立时期	注册地	研究技术平台
Argos Therapeutics	1997	美国	拥有先进的免疫疗法技术Arcelis平台
CureVac	2000	德国	拥有RNActive、RNArt、RNAntibody、RNAdjuvant 技术平台
BioNTech	2008	德国	拥有mRNA药物/疫苗、细胞治疗、抗体药物等药物研发平台
Moderna	2010	美国	拥有mRNA技术、交付技术和制造流程mRNA转化药物平台
eTheRNA Immunotherapies	2013	比利时	拥有基于APC激活mRNA平台开发新的免疫肿瘤疗法
斯微生物	2016	中国	拥有中国领先的mRNA药物平台和产品管线

注：以上信息均来自对应公司官网信息

体外合成RNA（IVT）主要是以DNA为模板通过体外转录得到，常用的是以线性化质粒DNA或PCR扩增产物为模板利用RNA聚合酶在体外转录合成。主要过程是利用含有T7启动子（TAATACGACTCACTATAGGG）或SP6启动子（ATTTAGGTGACACTATAG）序列的DNA为模板在含有T7或SP6 RNA聚合酶的条件下，以NTP为底物合成与模板DNA中一条链互补的mRNA，简单快速获得大量的mRNA分子，通过在5’端加上帽子结构和3’端加ployA尾加强mRNA的稳定性。

 

▲ 图：体外转录（IVT）mRNA生产和装配过程^[2]

 

体外合成RNA应用

 

 

体外合成RNA你是否有以下困惑

 

（1）如何获得转录模板？

（2）为什么自己配置反应体系无论如何优化都无法获得足够高的产率？

（3）有没有一款包含全套反应试剂的Kit，让我不在为体系配置而烦恼？

（4）需要一款性价比高的T7 Kit，让研究经费不在是我科研路上的拦路虎？

（5）有没有一款试剂盒适用于多种类型RNA的合成？

（6）……

 

翌圣生物经过匠心研发，开发出的高性价比的T7高产量体外合成试剂盒包含一整套的RNA合成所需试剂，并配有详细的教程。本试剂盒可以合成长转录本以及短转录本，以1μg的模板投入量可以产生100-200 μg的RNA，适用于单链 RNA合成（包括siRNA等各类RNA前体及RNA探针）和以Cap analog为引物合成Capped mRNA。

 

Hifair^® T7 High Yield RNA Synthesis Kit测试数据

 

▲ 图：不同长度转录-时间梯度电泳图

 

 ▲ 图：不同目的片段的转录产量

 

▲ 图：不同长度RNA转录及品质测试

 

翌圣生物提供您高品质、高性价比的T7合成试剂盒，助力您的科学研究和药物及疫苗的开发，共同为人类的未来健康事业奉献一份力量。

 

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产品名称	货号	规格
Hifair T7 High Yield RNA Synthesis Kit	10623ES50/60	50/100T

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产品名称	货号	规格
GTP Solution(100 mM) 鸟苷三磷酸溶液（100 mM）	10132ES03	1ml
NTP Set Solution(ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each）	10133ES03	1 Set (4 vial)
Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas 脱氧核糖核酸酶I，来源于牛胰腺	10607ES15/81	1/10*15KU
Murine RNase Inhibitor(200 U/μL) 鼠源RNase抑制剂	10610ES05/10	2/10KU
mRNA Vaccinia Capping Enzyme	10615ES76/84	500/2000U
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase	10616ES84/92	2000/10000U
T7 RNA Polymerase （1 KU/μl）	10617ES92/97	10/50KU
S-adenosylmethionine (SAM)	10619ES02	0.5ml
Murine RNase inhibitor (200U/μl , Glycerol-free) 鼠源RNase抑制剂	10703ES05/10	2/10KU

参考资料：

【1】Verbeke, Rein & Lentacker, Ine & De Smedt, Stefaan & Dewitte, Heleen. (2019). Three decades of messenger RNA vaccine development. Nano Today. 100766. 10.1016/j.nantod.2019.100766.

【2】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, ,Tailoring mRNA Vaccine to Balance Innate/Adaptive Immune Response,Trends in Molecular Medicine,Volume 26, Issue 3,2020,Pages 311-323.

 

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