本产品是大肠杆菌重组表达来源的噬菌体T7 RNA聚合酶，以含有T7启动子序列（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’）的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的反向单链DNA互补的RNA。双链线性平末端或5’突出末端DNA均可作为T7 RNA聚合酶的底物模板，因此线性质粒、PCR产物均可用作体外合成RNA的模板。
注：G*为RNA转录的第一个碱基。
| 编号 | 组分 | 产品编号/规格 | ||
| 10618ES90 (5000 U) | 10618ES96 (25000 U) | 10618ES97 (50000 U) | ||
| 10618-A | T7 RNA polymerase (50 U/μL) | 100 μL | 500 μL | 1 mL |
| 10618-B | 10×Transcription Buffer | 400 μL | 1 mL ×2 | 1 mL ×4 |
注：10×Transcription Buffer中含460 mM MgCl2和100 mM DTT，但不含有NTP，如需请购买本公司NTP set solution 10133。
-20℃保存，有效期一年。
Q:如何获得特定长度的 RNA 呢？
A:可以在插入位点下游选择限制酶切割，切割产生平末端或 5-突出端最好。
Q:T7 转录酶有没有验证过除 37℃外其他温度下的活性？
A:37℃和 42℃转录能力无差别，但是不耐 50℃。
Q:转录产物有杂带（偏大）是什么原因？
A:模板线性化不完全，导致转录停不下来，所以转录条带会偏大，出现杂带。
Q: T7酶的保真性能怎么样？有没有开展相关测试？
A: 我们的T7酶测试了相对保真度，与Thermo的保真度差不多，大概万分之四的突变率。目前野生型的T7保真度都差不多，基本能满足客户的需求。现项目中没有更高保真度T7的开发计划。
Q: 使用T7聚合酶的产量是使用LiCl纯化后进行测定的吗？有没有A260/280和A260/230的数据？
A: 是通过LiCl纯化后进行测定的，我们有记录过相关数据A260/280大概比值再在2.0-2.1之间；使用我们的羧基磁珠纯化也基本在这个范围以内。具体数据可以整理之后再分享。
Q: 采用T7聚合酶转录的时候，有没有什么办法，减少polyA尾多转录的问题？
A: 这一情况是T7反应体系的自身特性，无法完全避免。根据相关的文献，控制mRNA自延长的思路主要还是两方面：
①对模板3'末端上游序列进行优化；
②控制IVT产量，高产量下自我延伸的几率会更高。
