正常骨髓中存在一定量的储存铁，以含铁血黄素的形式储存于组织巨噬细胞中，可供有核红细胞利用合成血红蛋白，这种存在于红细胞以外的储存铁称为细胞外铁；部分中、晚幼红细胞及少数成熟红细胞也含有铁颗粒，分别称为铁粒幼红细胞及铁粒红细胞，它们属于细胞内铁。
组织学中常使用普鲁士蓝法检测细胞内、外铁，其检测原理是：在酸性条件下亚铁氰化物能与铁离子（三价）结合形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀（也即普鲁士蓝），定位于含铁部位，该法也是诊断学中检测灵敏度极高的一种铁染色方法。
本试剂盒适用于石蜡切片、冰冻切片、细胞染色。包括脑阔骨髓细胞涂片及血液细胞涂片的染色检查，另配备核固红做复染以区分含铁部位及细胞其他部位。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
| 60533ES20（20 T） | 60533ES60（100 T） | ||
| 60533-A | Fixation Buffer固定剂 | 20 mL | 100 mL |
| 60533-B | Potassium Ferrocyanide Solution亚铁氰化钾溶液 | 20 mL | 100 mL |
| 60533-C | Acid Solution酸性反应液 | 20 mL | 100 mL |
| 60533-D | Nuclear Fast Red solution 核固红溶液 | 20 mL | 100 mL |
注意事项
1）使用前应恢复室温，用前请摇匀试剂。
2）工作液现配现用。
3）所有玻片及器具应洁净、无铁污染（事先经除铁处理，尤其是载玻片），Perls stain染色时，应根据样本情况调整着色时间。
4）切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。
5）所有切片都应使用同一个阳性对照切片，选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很好的对照，包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。
6）每次试剂使用后，请迅速盖好密封保存，以免挥发及影响效果。
7）本试剂盒仅限于形态学染色观察使用。
8）冰冻切片和细胞染色，最好根据具体情况摸索实验条件。
9）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
10）本产品仅用于科研用途。
使用方法
工作液配制
临用前，取B和C等量混合即为Perls stain，不宜提前配制。
样品染色
（一）石蜡切片染色：
1、组织固定于Fixation Buffer固定剂中，常规脱水包埋。
2、切片厚度4 μm，常规脱蜡至水。
3、蒸馏水水洗1 min。
4、切片入Perls stain (见注意事项3)，浸染20～40 min。
5、蒸馏水充分冲洗2～5 min。
6、入核固红染色液，淡染细胞核1～5 min。
7、自来水冲洗1～5 s。
8、常规脱水透明，中性树胶封固.
（二） 冰冻切片染色：
1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3 min。
2、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，时间可以相应缩短。
（三）细胞染色：
1、Fixation Buffer固定剂固定10～20 min。
2、自来水冲洗2次，每次2 min。
3、蒸馏水冲洗2次，每次2 min。
4、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，但操作时间应相应延长。
结果参考
含铁血黄素或三价铁，结果呈蓝色；细胞核、其他组织，结果呈红色。
阴性对照
取相同切片脱蜡至水。入5%草酸孵育2～6 h，经Perls stain，其余步骤同上。结果为阴性。
冰袋运输。4 ℃避光保存。有效期1年。
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