天然蛋白G(Protein G)是一种分离自G型或C型链球菌属的细胞表面蛋白,与发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面的蛋白A类似,主要通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc区相互作用,结合大多数哺乳动物的IgG,可用于多种抗体(单抗和多抗)的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上,ProteinA 和Protein G结合性能不太一样,相比ProteinA, ProteinG 对牛、羊、马等多克隆抗体有更强的结合力,它还可以结合不能与ProteinA很好结合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1(详见附录1)。
本品使用的是基因改造后的蛋白G,不仅维持其本身的Ig亲和特性,同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合,rProtein G Agarose Resin以琼脂糖凝胶为基质,重组Protein G为配基,具有很高的物理化学稳定性。利用本品经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
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基质(Matrix) |
高度交联的4%琼脂糖微球 |
配体(Ligand) |
重组蛋白G |
孔径(Bead size) |
45-165µm |
最大流速(Flowmax) |
0.3 MPa, 3 bar |
储存缓冲液(Buffer) |
含20%乙醇的1×PBS |
载量(Capacity) |
>30mg human IgG/ml 基质 |
pH范围(pH range) |
3-10 |
Q:为什么柱子反压过高?
A:可能是填料被堵塞;裂解液中含有微笑的固体颗粒,建议上柱前使用 0.22 µm/0.45µm 滤膜过滤。
Q:为什么洗脱组分中没有目的蛋白?
A:可能是抗体被降解;建议适当的提高洗脱pH。
Q:该产品可以直接使用吗?
A:Protein A 琼脂糖珠最好在使用前充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。
Q:该产品可以贮存在-20℃吗?
A:不可以,不可冷冻该产品。应置于 4°贮存。
- Xie G, Du X, Hu H, et al. Structure and mechanism of the plant RNA polymerase V. Science. 2023;379(6638):1209-1213. doi:10.1126/science.adf8231(IF:56.9)
- Yang L, Gu W, Cheung KH, et al. InsP3R-SEC5 interaction on phagosomes modulates innate immunity to Candida albicans by promoting cytosolic Ca2+ elevation and TBK1 activity [published correction appears in BMC Biol. 2020 Nov 2;18(1):158]. BMC Biol. 2018;16(1):46. Published 2018 Apr 27. doi:10.1186/s12915-018-0507-6(IF:5.770)