热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶碱基与糖磷酸骨架间的N-糖苷键,释放游离的尿嘧啶。与普通UDG酶相比,热敏UDG可以避免常规UDG酶灭活后残留活性对含dU扩增产物的降解作用。本产品对温度敏感,55℃孵育5min或50℃孵育10min处理可完全失活。另外,UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile经过翌圣生物UCF.ME®超低残留工艺处理,大肠宿主DNA残留极低,适合对病原微生物检测等领域的需求。
1、UCF.ME®超低残留——E. coli基因组DNA残留<0.1 copies/ 1 U;
2、核酸酶残留低——无核酸外切酶、切口酶、RNase残留;
3、消化能力强——0.05 U/T即可消化105 copies/T dU-DNA产物;
4、热敏性好——50℃ 10 min,55℃ 5 min或95℃ 5min以上任意条件都可完全被灭活;
5、兼容RT-qPCR反应体系——在高投入量(2U/20μL反应体系)下对检测体系无影响。
1、蛋白纯度≥95%
图1. 14466ES蛋白纯度(SDS-PAGE法)检测结果图
2、核酸酶残留低:无核酸外切酶、切口酶、RNase残留
图2. 14466ES核酸酶残留检测结果图
3、消化能力强:0.05U/T即可消化105copies/T dU-DNA产物
图3. 使用14466ES配制qPCR mix,同时以不含UDG酶的qPCR mix为对照组,可完全消化105 copies/T dU-DNA产物。
4、热敏性好,5min即可完全灭活
图4. 50℃,10min;55℃,5min; 55℃,10min;95℃,5min热灭活处理后的14466ES均失去消化能力
5、兼容RT-qPCR反应体系,在高投入量(2U/T)下对检测体系无影响
图5. 使用新冠ORF1ab和N基因两种引物探针搭配14466ES配制成RT-qPCR mix,当14466ES投入量为2U/20μL反应体系时,对RT-qPCR反应无抑制
-25~-15℃保存,有效期2年。