Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括蛋白、多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上,进行特异性去除内毒素,经纯化可将样品中内毒素降低至0.1 EU/mL,且样品回收率高。
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基质(Matrix) |
4%琼脂糖微球 |
配体(Ligand) |
修饰过的多粘菌素B |
粒径(Bead size) |
45-165 µm |
载量(Capacity) |
>2000000 EU/mL基质 |
最大压力(PressureMax) |
0.1 MPa, 1bar |
pH稳定范围(pH range) |
5-10 |
储存缓冲液(Buffer) |
20%乙醇 |
2~8℃保存,有效期2年。
Q:为什么内毒素去除效率低?
A:可能是样品pH 值不在内毒素结合范围内;建议用 0.1MNaOH 或 0.1M HCl 调节至 pH7-8。
Q:为什么样品被污染?
A:树脂纯化过其他样品;不用使用过的树脂去除不同样品内毒素。
Q:为什么样品回收率低?
A:可能是样品非特异性吸附在树脂上;建议增加样品和平衡液的NaCl 浓度。
Q:本品可耐受哪些试剂?
A:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1M 尿素,300mM 咪唑;0.05% Tween 20, 10mM DTT 等
Q:如何确定需要使用的填料体积?
A:可根据填料的内毒素载量,可检测自己样品中的内毒素含量确定;如果实在无条件检测自己样品中的内毒素的含量,初次实验可按照填料:样品体积比=1:1或1:2上样
Q:你们的内毒素去除纯化树脂可以去除核酸样品中的内毒素嘛 比如说质粒或者DNA
A:不能
Q:这个填料去除蛋白的内毒素,一般蛋白的回收率和内毒素去除率能达到多少?
A:蛋白的回收率可达90%。内毒素去除率可达99%
Q:内毒素去除填料,客户想确认一下流速,客户采用 内径3.5cm的柱、打算填40ml料子、样品是经过过滤和过柱的蛋白液。想确认下流速可以开到多大?
A:样品过柱接触时间大于10min,40ml填料的最大流速不超过4ml/min
Q:内毒素去除填料,如果不用可以临时保存在1%的曲拉通X-114中吗,还是保存在推荐的平衡液中?
A:临时是多久,短时间储存30min左右都是可以的,如果是长时间不使用建议储存在平衡液中。
Q:内毒素去除纯化树脂对甘油耐受度是多少啊
A:推荐使用浓度不超过5%,高浓度甘油粘稠可能会影响到样品回收率。
Q:内毒素纯化树脂缓冲液可以用HEPES缓冲液吗?
A:可以
Q:内毒素去除的填料,首次使用前需要再生吗?
A:需要
Q:再生液的配制怎么保证无内毒素?
A:试剂用无内毒素水,容器进行去内毒素处理,或者选择不含内毒素的耗材。
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