Hifair® Ultra Reverse Transcriptase是对Hieff® M-MLV(H-) Reverse Transcriptase进行基因工程改造的全新逆转录酶，该酶缺乏RNaseH活性，合成全长cDNA的能力大幅提升，可扩增长达20kb的cDNA。Hifair® Ultra Reverse Transcriptase的热稳定性显著提高，耐受温度达65℃，可对具有复杂二级结构的RNA模板高效逆转录。与Hieff® M-MLV(H-) Reverse Transcriptase相比，Hifair® Ultra Reverse Transcriptase具有更高的持续合成能力及合成速率，同时增强了耐抑制剂的能力，可有效解决样品中的抑制剂导致逆转录效率低下的问题。
应用场景：
- 全长cDNA文库构建；
- 终点法PCR；
- RT-PCR及实时定量RT-PCR等。
- 超高灵敏度：可对1pg Total RNA有效逆转录；
- 快速逆转录：5 min即可完成cDNA合成；
- 持续合成能力强：无RNase H活性，最大合成长度可达20 kb；
- 高热稳定性：最高反应温度可达65℃，提升复杂结构模板兼容性；
- TdT活性：可向合成的DNA 3′ 末端非模板特异性地添加核苷酸。
- 无切口酶及核酸外切酶残留
图1. 切口酶及核酸外切酶残留检测
在20 μL反应体系中加入200 U 14604ES及0.5 μg 不同类型的底物DNA，37℃孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测DNA谱带不发生变化，表明14604ES无切口酶及核酸外切酶残留。
- 无RNase残留
图2. RNase残留检测
在20 μL反应体系中加入200 U 14604ES和0.5 μg底物RNA, 37℃孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测RNA谱带不发生变化，表明14604ES无RNase残留。
- 应用于RT-qPCR，具有优异的灵敏度及批次间稳定性。
图3. RT-qPCR检测数据，红，蓝，绿分别表示14604ES的3个不同批次
分别投入5、50、500 ng的293T RNA，使用3个批次的14604ES在55℃逆转录5 min，逆转录产物进行qPCR检测，结果显示14604ES的3个批次在各个投入量下，△Ct值均< 0.5，表明14604ES具有优异的灵敏度及批次间稳定性。
- 建库产量及宿主DNA残留优于进口品牌
图4. 14604ES应用于RNA-seq建库产量
图5.14604ES应用于 RNA-seq测序质量
应用于RNA建库，14604ES的建库产量高于进口品牌，测序数据质量相当且宿主DNA残留更低。
干冰运输，-20ºC保存，有效期一年。
