GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF是一种GST标签蛋白纯化树脂,结构上是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,通过12个原子的间隔臂,用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。
此外,本品特异性好,性价比高,可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。
基质(Matrix) |
高度交联的4%琼脂糖微球 |
配体(Ligand) |
通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽 |
粒径(Bead size) |
45-165 µm |
载量(Capacity) |
>10 mg GST蛋白(40 kDa)/mL基质 |
最大压力(PressureMax) |
0.3 MPa,3 bar |
pH稳定范围(pH range) |
3-12 |
储存缓冲液(Buffer) |
含20%乙醇的1×PBS |
2~8℃保存,有效期2年。
Q:该产品使用之前为什么需要颠倒若干次?
A:本品谷胱甘肽纯化树脂由琼脂糖微球构成,若干次颠倒可使琼脂糖珠混合均匀。
Q:样品可以在室温下操作吗?
A:尽量避免,最好在 4℃或者冰上操作。
Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?
A:可能是柱子平衡时间太短,目的蛋白不是在 pH 6.5-pH 8.0 范围内结合,建议用pH 6.5-pH 8.0 的buffer 进行充分的平衡,如 PBS。
Q:为什么电泳或 Western Blot 检测中发现多条带?
A:可能是细胞破碎过度,建议减少细胞破碎时间,超声前加入溶菌酶(菌液体积的
0.1 倍 10 mg/mL 溶菌酶,25 mM Tris-HCl,pH 8.0),避免发泡导致蛋白酶变性,过度超声破碎增加宿主内源蛋白与 GST 融合目的蛋白的共纯化。
Q:洗脱液怎么配?
A:按说明书用平衡缓冲液配制还原性谷胱甘肽(货号:60342)即可,配完后需要检测PH是否跟平衡缓冲液一致,部分谷胱甘肽溶解后ph会偏酸。
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