GST标签蛋白纯化磁珠是一种专为高效、快速纯化谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白而设计的一种新型超顺磁性微球产品,具有快速磁响应性、丰富羟基官能团和粒径相对集中等特点。该磁珠可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行GST 融合蛋白的纯化。
本品特异性好,性价比高,可以一步从细菌、酵母菌或哺乳动物天然细胞裂解物中纯化谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。GST是重组蛋白制备过程中常用的一种标签蛋白,以辅助目的蛋白表达、检测、纯化。
同时,在使用磁性分离法的Pull-down实验中,充当“诱饵蛋白”的重组GST融合蛋白通过亲和作用与磁珠结合,当目标蛋白与固相载体混合时,就可被诱饵蛋白吸附,在磁力下,目标蛋白就从表达体系中分离出来,使用该磁珠进行GST Pull-down实验,由于磁性分离不需要多次离心和较长的孵育时间,与传统的层析法相比,操作更简单、快速和自动化。
翌圣为您提供蛋白纯化实验整体解决方案,相关产品选购请参考:蛋白纯化系列产品-选购指南
基质 |
磁性琼脂糖微球 |
配体 |
Glutathione (谷胱甘肽) |
载量 |
5-10 mg GST标签融合蛋白/ mL磁珠 |
粒径 |
30-100 μm |
磁珠浓度 |
磁珠悬浮于保护液中,含量为20% |
储存缓冲液 |
含20%乙醇的1×PBS |
冰袋运输。4℃长期储存,有效期2年。
Q:目标蛋白回收率低怎么办?
A:1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间;
2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度;
3)添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;
4)增加磁珠用量;
5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数;
6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。
Q:如何提高目标蛋白纯度?
A:1)适当提高样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度;
2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;
3)在样品溶液和缓冲液中加入表面活性剂等物质;
4)延长清洗的时间,增加清洗次数。
1.Zhu Q, Ayaz Ahmad, et al. Protein arginine methyltransferase 6 mediates antiviral immunity in plants. Cell Host & Microbe. 2024. doi: 10.1016/j.chom.2024.07.014.(IF:20.6)