Hifair® V C58P2 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)是以 RNA 为模板进行多重定量 PCR 反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。
本试剂盒利用耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA,并利用 UNICON® HotStart Taq DNA
Polymerase 进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的 MP Buffer,Enzymes Mix 等,缓冲液中已含有 Mg2+ 和 dNTPs, 以及有效抑制非特异性 PCR 扩增的因子和提升多重 qPCR 反应扩增效率的因子,能够在保证引物扩增效率的同时,进行多重扩增反应。此外,该预混液添加了 dUTP/UDG 系统,可有效防止气溶胶污染。
1、优异的扩增灵敏度:精心优化的缓冲体系,提高了低浓度模板的检测灵敏度,可达250 copies/mL;
2、出色的储存稳定性:18个月实时稳定性检测合格。
3、dUTP/UDG 防污染系统:引入 dUTP/ UDG 防污染系统,高效降解产物的气溶胶污染,减少假阳性;
4、支持快速程序:兼容快速程序,40 min内完成结果检测。
(1)优异的扩增灵敏度
使用13650ES试剂,同时检测梯度稀释(500copies/ml、250copies/ml)的新冠假病毒的ORF基因和N基因,每个浓度检测16个复孔,检出率均为100%。
(2)18个月性能稳定
对-20℃保存18个月的13650ES留样批次(蓝色扩增曲线),和效期内的13650ES(红色扩增曲线),同时检测新冠假病毒ORF基因和N基因(1000copies/ml,20个复孔),检出率均为100%,且扩增曲线峰形和Ct值无显著差异。
(3)反复冻融性能稳定
将13650ES使用干冰反复冻融30次、50次,和-20℃正常保存的试剂,同时检测新冠假病毒ORF基因,结果表明13650ES冻融50次性能不受影响
红的:-20℃保存13650;紫色:冻融30次的13650;绿色:冻融50次的13650ES
(4)兼容常规程序和快速程序
使用13650ES,检测新冠假病毒的ORF基因和N基因,在相同反应体系下分别使用常规程序和快速程序进行检测,结果表明:4重体系下,两者扩增曲线峰型及Ct值无差异。
-25~-15℃保存,有效期18个月。