HisSepNi-NTAAgaroseResin6FF以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联四配位的氮川三乙酸(NTA)为配体,螯合镍离子(Ni2+)后,形成非常稳定的八面体结构,镍离子处于八面体的中心,这样的结构可保护镍离子免受小分子的进攻,更加稳定,可以耐受一定浓度的还原剂、变性剂或耦合剂等苛刻条件。此外,因其基质的耐压性(可耐受最高0.3MPa的压力),该产品可以用于工业大规模蛋白的纯化,可在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化。
基质(Matrix) | 高度交联的6%琼脂糖凝胶 |
粒径(Bead size) | 45-165 µm |
载量(Capacity) | >40 mg 6×His-tagged protein/mL基质 |
耐压(Tolerance Pressuremax) | 0.3 MPa,3 bar |
储存缓冲液(Buffer) | 含20%乙醇的1×PBS |
冰袋运输。4℃保存。有效期2年。
Q:为什么填料会呈现褐色?
A:缓冲液中含有DTT 等还原剂,适当降低还原剂 DTT 的浓度,或改用巯基乙醇。
Q:为什么在上样过程中蛋白发生沉淀?
A:可能是操作温度太低,建议在可在室温下进行上样。
Q:洗脱组分不纯(含多种蛋白)是什么原因?
A:可能是洗杂不彻底:建议增加Wash Buffer 体积;
Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?
A:可能是目的蛋白结合比较弱,在洗杂步骤中已被洗下来:提高 Wash Buffer 的pH 值,或者降低咪唑浓度。
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