Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构;存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中;Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
本试剂盒PKH26外泌体红色荧光示踪染料能将脂质尾巴的红色荧光染料(PKH26)结合到细胞膜脂质区域上。该试剂盒可以在染色过程中增加染色效率,同时维持细胞活力。可用于外泌体的标记染色实验,监测细胞吞噬作用。
化学名称(Chemical name) | PKH26 |
CAS号(CAS NO.) | 154214-55-8 |
分子式(Formula) | C59H97IN2 |
分子量(Molecular weight) | 961.32 |
外观(Appearance) | liquid |
激发波长(Ex) | λex 551 nm |
发射波长(Em) | λem 567 nm |
结构式 | ![]() |
操作方法
1.外泌体蛋白定量:取适量外泌体进行BCA蛋白浓度测定以确定外泌体蛋白量;
2.染料工作液制备:用“Dilution buffer”将“PKH26”储存液稀释10倍,配制浓度为100 μM的染料工作液(避光操作,工作液应根据实验用量适当配置,现配现用);
3.外泌体染色:
(1)在外泌体中加入染料工作液,建议加入剂量如下:
(2)加入染料工作液后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再静置孵育10min;
(3)向孵育后的外泌体-染料复合物中加入10 mL的1x PBS混匀;
(4)按照外泌体提取方法再次提取外泌体以去除多余染料;
(5)取200 μL 1×PBS重悬沉淀物,沉淀即为染色后的外泌体。
注意事项
1.PKH26 母液易水解,建议分装保存,分装后用封口膜密封保存;
2.PKH26 工作液应现配现用,不能能提前配制,否则将影响染色效果;
3.PKH26 溶解液在较低温度下会凝固而粘在管底内,可以 37℃水浴片刻至全部融解后使用。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5.本产品仅作科研用途!
注意:过度染色会导致外泌体膜完整性丧失,最佳PKH26染料/外泌体用量需根据自身实验而决定。
1.收到产品后将试剂分开储存,使用前请充分混匀。
2.冰袋运输,2-8℃避光保存,有效期12个月。
Q: 外泌体荧光示踪试剂盒,第三步添加的10mlPBS,其他厂家是添加含1%BSA的PBS终止染色,我们这一步是否需要添加1%BSA的PBS?
A: 我们的试剂盒不需要添加1%BSA,是否含1%BSA差距不大。
Q: 提取的外泌体想保存一周后再染色,是保存于-80度吗?还是-20度也可以?
A: 需要-80保存。