ArCas12a核酸内切酶，源自Agathobacter rectalis细菌的CRISPR系统，别名Cpf1，是一个包含1263个氨基酸的单体蛋白。作为CRISPR/Cas系统的II类（V型）成员，ArCas12a仅由单一的效应蛋白行使功能，其特性与Cas9存在显著差异,例如靶向富含T的基序、不需要反式激活crRNA、DNA双链断裂产生粘性末端、参与RNA加工、具有DNA核酸酶活性等。

Cas12a缺乏HNH结构域，可单独利用其RuvC结构域在CRISPR RNA（crRNA）引导下识别位于靶标核酸5’端富含胸腺嘧啶（T）的PAM区而启动对靶标DNA的切割，已成功用于许多哺乳动物和植物的基因组编辑。此外Cas12a还具有反式切割活性，可不加选择地切割反应体系中的非靶标单链DNA。

与其它LbCas12a/AsCas12a相比，ArCas12a具有更高的温度适应性（25-55℃），可适用于基因组编辑及核酸检测等。

• 双链DNA高效体外切割；
• 反式切割活性强，可用于核酸检测；
• 与其它LbCas12a/AsCas12a相比，ArCas12a具有更高的温度适应性（25-55℃），可适用于基因组编辑及核酸检测等。

• 双链DNA高效体外切割

以双链DNA模板为靶标，加入ArCas12a、crRNA（存在与模板DNA序列互补的spacer区）进行体外切割，琼脂糖凝胶电泳检测切割效果。结果显示翌圣的ArCas12a在crRNA的引导下可高效的切割双链DNA（600 bp）产生两段切割产物（200 bp/400 bp）。

图1. ArCas12a顺式切割活性检测 M：Marker；C：模板双链DNA.

2、反式切割活性强，可用于核酸检测

以双链DNA模板为靶标，加入ArCas12a、crRNA（存在与模板DNA序列互补的spacer区）及单链DNA报告探针（含有荧光报告集团）进行体外切割，当ArCas12a与crRNA及靶标DNA形成复合体后会激活反式切割活性，切割单链DNA报告探针，从而发出荧光。结果显示，翌圣ArCas12a与crRNA及模板DNA形成复合体后具有反式切割活性，可剪切单链DNA。

图2. ArCas12a反式切割活性检测

3、无核酸外切酶残留

将底物DNA与10 pmol ArCas12a共同孵育，琼脂糖凝胶电泳检测，结果显示翌圣的ArCas12a无核酸外切酶残留。

图3. ArCas12a核酸外切酶残留检测 C：阴性对照

4、无RNase残留

将底物RNA与5 pmol ArCas12a共同孵育，琼脂糖凝胶电泳检测，结果显示翌圣的ArCas12a无RNase残留。

图4. ArCas12a RNase残留检测 C：阴性对照

-25~-15℃保存，有效期2年。